產(chǎn)品展示PRODUCTS
呼吸合胞病毒動(dòng)物模型構(gòu)建
更新時(shí)間：2025-07-11
訪問(wèn)量：462
廠商性質(zhì)：其他
一、呼吸合胞病毒動(dòng)物模型構(gòu)建選擇依據(jù)
| 動(dòng)物種類(lèi) | 適用場(chǎng)景 | 優(yōu)缺點(diǎn) |
|---|---|---|
| 棉鼠 | 經(jīng)典模型，支持RSV高效復(fù)制，模擬人類(lèi)病理特征（細(xì)支氣管炎） | ? 高病毒載量 ? 需特殊飼養(yǎng)（無(wú)病原體環(huán)境） |
| BALB/c小鼠 | 廣泛用于免疫機(jī)制研究，對(duì)RSV敏感（需幼鼠或免疫抑制處理） | ? 成本低、工具鼠品系多 ? 病毒復(fù)制有限（需高滴度接種） |
| 恒河猴 | 接近人類(lèi)感染，用于疫苗臨床前評(píng)價(jià) | ? 生理相似性高 ? 倫理和成本限制 |
| 雪貂 | 研究RSV與流感共感染或氣道生理變化 | ? 呼吸生理接近人類(lèi) ? 病毒適應(yīng)性需驗(yàn)證 |
二、呼吸合胞病毒動(dòng)物模型構(gòu)建核心步驟
1. 病毒準(zhǔn)備
毒株選擇：
實(shí)驗(yàn)室株（如RSV A2、Long株）或臨床分離株（如RSV B/ON1）。
病毒擴(kuò)增：HEp-2細(xì)胞培養(yǎng)，滴度≥1×10? PFU/mL（空斑試驗(yàn)驗(yàn)證）。
2. 動(dòng)物感染
接種途徑：
麻醉動(dòng)物（異f烷），垂直滴鼻（50 μL，含1×10?–10? PFU病毒）。
幼鼠模型（<7日齡）：無(wú)需麻醉，直接滴鼻（3–5 μL）。
鼻內(nèi)接種（最c用）：
氣管內(nèi)接種（精準(zhǔn)下呼吸道感染）：需手術(shù)暴露氣管，注射病毒液（適用于棉鼠或猴）。
3. 感染后監(jiān)測(cè)
病毒載量檢測(cè)：
采集肺組織（感染后3–5天峰值期），勻漿后qPCR檢測(cè)RSV N基因或噬斑試驗(yàn)。
病理評(píng)估：
肺組織H&E染色：細(xì)支氣管周?chē)装Y、上皮細(xì)胞壞死評(píng)分（0–4分）。
免疫組化：RSV F蛋白染色定位病毒分布。
免疫應(yīng)答分析：
肺泡灌洗液（BALF）：細(xì)胞計(jì)數(shù)（中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞）、ELISA檢測(cè)IL-6、IFN-γ等。
脾臟/淋巴結(jié)：流式細(xì)胞術(shù)分析T細(xì)胞亞群（CD4+/CD8+）。
三、模型優(yōu)化策略
1. 增強(qiáng)病毒復(fù)制（小鼠模型）
免疫抑制預(yù)處理：
環(huán)磷x胺（100 mg/kg，腹腔注射）或抗IFNAR1抗體（阻斷I型干擾素應(yīng)答）。
幼鼠優(yōu)先：<7日齡小鼠因免疫系統(tǒng)未成熟，病毒復(fù)制更顯著。
2. 模擬重癥感染
高滴度病毒（≥10? PFU/只）或免疫缺陷鼠（如STAT1?/?）。
繼發(fā)細(xì)菌感染：RSV感染后接種肺炎鏈球菌（模擬臨床并發(fā)癥）。
3. 疫苗評(píng)價(jià)模型
攻毒實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：
免疫后4周接種RSV，比較肺病毒載量（疫苗組 vs 佐劑對(duì)照組）。
注意：甲醛滅活RSV疫苗可能引發(fā)Th2型免疫偏移（嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)）。
四、注意事項(xiàng)
生物安全：RSV操作需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，動(dòng)物飼養(yǎng)需獨(dú)立通風(fēng)籠具（IVC）。
對(duì)照設(shè)置：
陰性對(duì)照（PBS接種）、滅活病毒對(duì)照（評(píng)估非特異性炎癥）。
動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：
體重下降（>20%需安l死）、呼吸頻率（全身體積描記法）。
