阿爾茨海默病動(dòng)物模型

動(dòng)物類型：昆明小鼠

造模試劑(1)：Aβ25-35

造模方法：小鼠經(jīng)腹腔注射麻醉，固定于腦立體定位儀，暴露前鹵，參照腦立體定位圖譜，每只小鼠右側(cè)腦室注射3μl Aβ25-35（2μg/μl）。坐標(biāo)為前鹵后1.2mm，矢狀縫右側(cè)旁開1.2mm，即為側(cè)腦室的體表部位，進(jìn)針深度為顱骨表面向下3.2mm；注射時(shí)進(jìn)針1μl/min，注射后留針8min，拔針時(shí)速度為1mm/min。

造模試劑(2)：AlCl3

造模方法：小鼠右側(cè)腦室內(nèi)注射3μl AlCl3（2.5%），注射坐標(biāo)方法同上。

造模試劑(3)：海馬物理損傷

造模方法：小鼠固定于腦立體定位儀，坐標(biāo)為前鹵后2.4mm，矢狀縫右旁開2.0mm，使用自制首端彎曲的9號(hào)針頭垂直插入兩側(cè)海馬，順時(shí)針轉(zhuǎn)一周，進(jìn)針深度為顱骨表面向下3mm。

直接購買AD轉(zhuǎn)基因小鼠(4)

轉(zhuǎn)基因模型可分為：APP轉(zhuǎn)基因模型，PS-1轉(zhuǎn)基因模型，ApoE4轉(zhuǎn)基因模型，tau蛋白轉(zhuǎn)基因模型，雙重和三重轉(zhuǎn)基因模型

造模方法：各轉(zhuǎn)基因動(dòng)物AD模型制作方法和原理基本相同，以APP轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型為例：

從人類cDNA文庫可獲取h-APP基因cDNA可表達(dá)片段，在5’端連接合適的啟動(dòng)子，3’端連接SV40及其PolyA尾既構(gòu)成外源h-APP基因。H-APP基因經(jīng)體外擴(kuò)增，裂解純化去除質(zhì)粒序列后，通過一定的方法直接注入小鼠受精卵或早期胚胎細(xì)胞核內(nèi)使之穩(wěn)定地整合于染色體內(nèi)，將該受精卵或胚胎細(xì)胞植入假孕母*宮或輸卵管內(nèi)發(fā)育成熟，即可獲得穩(wěn)定表達(dá)外源h-APP基因的基因鼠。